PCR実験室設計の中核：
1、PCRラボのレイアウト
PCR増幅テストラボは、原則として、試薬の保管と準備のエリア、検体の準備のエリア、増幅と増幅産物の分析エリアの3つの別々の作業エリアに分かれています。相互汚染を避けるために、各作業エリアへの進入は、厳密に一方向、つまり試薬保管および準備エリア→試料準備エリア→増幅および増幅産物分析エリアからのみである必要があります。各実験エリア間での試薬およびサンプルの移送は、移送ウィンドウを介して実行する必要があります。
2。実験室の空調および換気システムの設計と圧力制御
PCRラボには厳密な精製レベルの要件はありませんが、さまざまな実験領域間の相互汚染の可能性を回避するために、完全なデリバリーと完全な排気組織の形式を採用することをお勧めします。同時に、各実験領域の圧力要件を確保するために、給気と排気の比率を厳密に制御する必要があります。
（1）試薬の保管と準備エリア
この実験領域の主な操作は、保管試薬の準備、試薬の分注、および主な反応混合物の準備です。サンプル前処理に使用する試薬と材料は、他のエリアを通らずに、このエリアに直接輸送する必要があります。試薬の原材料は、このゾーンで保管し、このゾーンで必要な保管試薬に準備する必要があります。気流圧力を制御するために、この領域は外部でわずかな陽圧を維持する必要があります。
（2）標本準備エリア
この領域の主な操作は、サンプルの保存、核酸（RNA、DNA）の抽出、保管、増幅反応チューブへの追加、DNA合成の測定です。この領域の圧力勾配は、隣接する領域から領域に入るエアロゾル汚染を回避するために、隣接する領域に対して正圧である必要があります。さらに、サンプルのロード操作中にエアロゾルによる汚染が発生する可能性があるため、この領域での不要な歩行は避けてください。
（3）増幅および増幅産物分析領域
この領域の主な操作は、DNA増幅と増幅断片の測定です。さらに、（サンプル調製領域から）調製されたDNAテンプレートの追加、および反応混合物への（試薬保管および調製領域からの）主反応混合物の調製も、この領域で実行できます。この領域での圧力勾配の要件は、次のとおりです。この領域からのエアロゾルの漏出を回避するための、隣接領域に対する負圧。エアロゾルによる汚染を避けるために、エリア内の不要な歩行を最小限に抑える必要があります。サンプルの追加などの個別の操作は、超クリーンベンチで実行する必要があります。
3。汚染防止と管理
PCR実験室設計の中心的な問題は、汚染を回避する方法です。実際の作業では、次のタイプの汚染が一般的です。増幅産物の汚染。自然のゲノムDNAの汚染;試薬の汚染および検体間の汚染。汚染が発生すると、汚染の原因が見つかるまで実験を停止する必要があるため、実験結果を無効にし、実験を繰り返す必要があります。したがって、汚染が発生した後に実験室周辺の汚染源を見つけ、人的資源と材料資源を浪費することは、時間と手間がかかります。したがって、汚染を回避するために、最優先事項は除去ではなく防止であるべきです。
（1）作業領域の厳格な分割
各実験領域の設定は妥当です。異なる実験エリアでの機器や試薬の混乱を避けるために、各実験エリアには明確なマーキング（人目を引く家の番号や異なる地色など）を付ける必要があります。
（2）適切なシステム設定
合理的な空調と換気システムの設定、完全な配信と完全な排気空調システムを使用してみてください。厳密な気流圧力制御により、さまざまな実験領域でさまざまな圧力要件を確保します。
（3）標準操作
増幅テストラボの技術者は、実地トレーニングを受けなければなりません。資格を取得した後にのみ、臨床遺伝子増幅テストに従事できます。実験作業中は、作業者は手袋を着用し、頻繁に手袋を交換する必要があります。さらに、作業中に使い捨てキャップを使用することも、汚染を防ぐための効果的な対策です。清掃作業はタイムリーで正確です。実験作業が終わったら、すぐにエリアを掃除する必要があります。表面または紫外線照射消毒を拭いて消毒するための従来の消毒液に加えて、いくつかの実験装置もオートクレーブ処理する必要があります。
（4）厳格な管理
実験室に出入りする要員を厳密に管理します。実験とは何の関係もない職員は、自由に研究室に出入りすることはできません。可能であれば、実験エリア全体に出入りするための独立した通路とドアを設置します。交差汚染の可能性を減らすために、実験エリアでの不必要な歩行を最小限に抑えます。増幅産物分析領域は、増幅産物の主な汚染源です。廃液は実験室に捨てることはできません。消毒液に浸して消毒し、実験室から廃棄する必要があります。使用済みチップなどの使い捨て材料も消毒する必要があります。浸漬消毒後、焼却等の均一処理を行います。増幅産物分析領域では、いくつかの遺伝子変異や有毒物質が使用される可能性があり、実験担当者の安全保護に特別な注意を払う必要があります。
（5）完全な実験室支援施設
実験を確実に行うには、完全な実験室支援施設が必要です。対応する機器および機器は、超クリーンベンチ、遠心分離機、サンプラーなど、各実験室の異なる実験内容に従って装備する必要があります。