研究所がたくさんあることは誰もが知っていますが、PCR 研究所について知っている人はどれだけいるでしょうか? PCR ラボを設計するための基本的な要件は何ですか?それからVOLAB Xiaobianがみんなと話し合う予定です~
1、PCR検査室のレイアウト
PCR 増幅検査ラボは原則として、試薬保管および調製エリア、サンプル調製エリア、増幅反応混合物の調製および増幅エリア、増幅産物分析エリアの 4 つの作業エリアに分かれています。相互汚染を避けるため、各作業エリアへの立ち入りは厳密に単一の方向に従う必要があります。つまり、試薬保管および調製エリア → 検体調製エリア → 増幅反応混合物の調製および増幅エリア → 増幅産物分析エリアの順にのみ行う必要があります。各実験ゾーン間の試薬とサンプルの移動は、移動ウィンドウを通じて実行する必要があります。
2. 実験室空調換気システムの設計と圧力制御
PCR 研究所には厳格な浄化要件はありませんが、さまざまな実験エリア間の相互汚染の可能性を避けるために、フルフロー空気分配システムを使用することをお勧めします。{0}{1}同時に、各実験領域の圧力要件を確保するために、送液と排気の比率を厳密に制御する必要があります。
2.1、試料調製エリア
この分野での主な操作は、サンプルの保存、核酸 (RNA、DNA) の抽出、保管、増幅反応チューブへの添加、および DNA 合成の測定です。この領域における圧力勾配の要件は、隣接領域からこの領域へのエアロゾル汚染を避けるために、隣接領域に対して正圧であることです。さらに、積み込み作業中はエアロゾル-による汚染の可能性があるため、そのエリア内を不必要に歩くことは避けるべきです。
2.2.試薬の保管および準備エリア
この実験エリアでの主な作業は、保存試薬の準備、試薬の分注、および主反応混合物の調製です。サンプル調製に使用される試薬および材料は、このエリアに直接輸送する必要があり、他のエリアを経由してはなりません。試薬原料はこのエリアに保管し、そのエリアで必要な保管試薬に調製する必要があります。空気圧の制御には厳密な要件はありません。
2.3、増幅産物解析エリア
この領域の主な操作は、増幅されたフラグメントの決定です。この領域は、増幅産物の主な汚染源です。したがって、この領域の圧力勾配要件は次のとおりです。 増幅産物がその領域から他の領域に拡散するのを避けるために、隣接する領域に対して負の圧力。
2.4、増幅反応混合物の調製と増幅ゾーン
この分野での主な操作は DNA 増幅です。また、調製したDNA鋳型（サンプル調製エリアから）や主反応混合物（試薬保管・調製エリアから）を加えて反応混合物を調製するなどもこのエリアで行うことができます。この領域における圧力勾配の要件は、隣接する領域に対する負圧であり、その領域からのエアロゾル漏れを避けることです。エアロゾルによる汚染を避けるために、その地域での不必要な歩行は最小限に抑える必要があります。サンプリング等の個別作業はクリーンベンチ内で行ってください。
3.1.厳密な作業領域の分割
(1) 各実験領域の設定が合理的であること。
(2) 異なる実験エリアの機器アイテムや試薬間の混同を避けるために、各実験エリアには明確なマーク (家番号を打つ、異なる地色など) を付ける必要があります。
3.2、適切なシステム設定
(1) 合理的な空調換気システム設定。-送風空調システム-をフルに使用するようにします。
(2) 厳格な気流圧力制御により、異なる実験領域で異なる圧力要件が保証されます。
3.3、標準操作
(1) 増幅検査ラボの技術者は、実地訓練を実施する必要があり、訓練に合格した後にのみ臨床遺伝子増幅検査に従事することができます。--
(2) 実験作業中は手袋を着用し、頻繁に交換する必要があります。さらに、作業中に使い捨てキャップを使用することも汚染を防ぐ効果的な手段です。
(3) 清掃作業は適時かつ適切に行われます。実験が終了したら、そのエリアをすぐに掃除する必要があります。表面の消毒や紫外線ランプの照射と消毒のための従来の消毒液に加えて、一部の実験器具も高圧滅菌する必要があります。
3.4、厳正な管理
(1) 研究室への人の出入りを厳重に管理する。実験に関係のない者は実験室に自由に出入りしてはならず、必要に応じて実験エリア全域に独立した通路や扉を設けること。
(2) 相互汚染の可能性を減らすために、実験エリア内での不必要な歩行を最小限に抑えます。-。
(3) 増幅産物分析エリアは、増幅産物の最も重要な汚染源です。廃液を実験室に捨てることはできません。消毒液に浸した後、実験室から離れた場所に廃棄する必要があります。使用するチップは使い捨てです。また、材料は消毒および滅菌した後、焼却などの均一な処理を行う必要があります。
(4) 増幅産物解析領域では、特定の遺伝子変異や有害物質が使用される場合があり、実験者の安全保護には特別な注意を払う必要があります。
3.5.充実した実験設備
実験作業を確実に行うには、実験室をサポートする設備が充実していることが必要条件です。ウルトラクリーンベンチ、遠心分離機、サンプルフィーダーなど、各研究室の異なる実験内容に応じて、対応する機器や機器を備え付ける必要があります。-